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日期:2023-11-28瀏覽:1308次
如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)生涯沒有在實(shí)驗(yàn)室里翻箱倒柜找移液器的經(jīng)歷,那就太遺憾了! 作為實(shí)驗(yàn)室的“必需品",每天移液的次數(shù)可能達(dá)到上千次甚至上萬次,如果移液器不好用或者不準(zhǔn)確,那么就會感到非常難受。因此,“保護(hù)"移液器也是保護(hù)自己! |
1、設(shè)定移液體積:
從大容量調(diào)整到小容量時(shí),逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度到所需容量;
從小容量調(diào)整到大容量時(shí),應(yīng)先順時(shí)針旋轉(zhuǎn)調(diào)至超過設(shè)定體積刻度,然后再回到所需容量,這樣可以保證移液的精度。
2、匹配安裝吸頭:
吸頭選擇原則:低吸附、錐度好、同心度好。
對于單通道移液器,將移液器垂直插入吸頭,輕輕按壓并左右旋轉(zhuǎn),上緊即可;
對于多通道移液器,將移液器的第一通道與第一個(gè)吸頭對準(zhǔn),稍微傾斜插入,前后輕輕晃動(dòng)確保安裝牢固。
(注意:請不要重復(fù)撞擊移液器,因?yàn)殚L期這樣操作可能導(dǎo)致移液器的零部件因撞擊變松動(dòng),甚至損壞刻度調(diào)節(jié)旋鈕。
3、吸液和放液:
吸液前槍頭現(xiàn)在液體中預(yù)潤洗2-3次確保移液的精度和準(zhǔn)度;
吸液時(shí),要確保移液器垂直且吸頭浸沒盡量淺一些,具體的浸入深度還應(yīng)根據(jù)盛放液體的容器大小靈活掌握;
放液時(shí),吸頭尖靠在容器內(nèi)壁(特別是對于20 μL 以下的體積),移液器角度 20° - 45°。體積低于 10 μL 直接放液到容器底部;吸液和放液時(shí)務(wù)必要慢吸慢放,以免液體進(jìn)入吸頭過快而沖入到移液器內(nèi)部腐蝕活塞。
4、移液方式:
正向移液:
推薦用于水溶液,如緩沖液、稀釋酸或堿,該技術(shù)通常用于移液和將樣品或試劑混合到另一種液體中。
反向移液:
該技術(shù)通常與空氣置換移液器一起使用,并推薦用于小體積的精確移液。反向移液避免了樣品飛濺、起泡或氣泡形成的風(fēng)險(xiǎn)。
重復(fù)移液:
該技術(shù)用于相同體積的重復(fù)分配,是將試劑添加到微孔板的管或孔中的理想選擇。
1、如果長時(shí)間不使用,要把移液器的量程調(diào)至最大刻度,讓彈簧處于松弛狀態(tài),以保護(hù)彈簧;
2、定期清潔移液器外壁,可以使用95%酒精或60%異丙醇進(jìn)行清潔,再用蒸餾水擦拭,自然晾干;
3、在使用時(shí)要檢查是否有泄漏現(xiàn)象,一種方法是在吸取液體后懸空垂直幾秒,看看液面是否下降,如果漏液,則檢查吸液嘴是否匹配,以及彈簧活塞是否正常;
4、當(dāng)移液器的吸嘴有液體時(shí),嚴(yán)禁水平或倒置放置,以防液體流入活塞室并腐蝕移液器的活塞;
5、在安裝吸頭時(shí),不要過度用力,更不能采用剁吸頭的方式進(jìn)行安裝。
移液器和測試使用的蒸餾水應(yīng)提前4小時(shí)放進(jìn)恒溫器室,校準(zhǔn)應(yīng)在無通風(fēng)的房間操作且室內(nèi)溫度20+5℃,濕度40%一70%RH。 |
一、所需設(shè)備和物品:
萬分之一電子天平、蒸餾水、校準(zhǔn)工具、待校準(zhǔn)移液器;
二、步驟:
1、打開電子天平,進(jìn)行零點(diǎn)校準(zhǔn):將小燒杯放在天平上,等待天平穩(wěn)定后,按下歸零鍵進(jìn)行歸零;
2、將移液器的容量調(diào)至所需的檢測點(diǎn)。檢測點(diǎn)通常選擇最小、中間和最大容量值之一,或者某個(gè)特定容量點(diǎn);(這里我們以10-100微升的hipette移液器為例)
3、安裝適當(dāng)?shù)奈鹤煸谝埔浩魃?,對移液器的槍頭進(jìn)行預(yù)沖洗,使用移液器將蒸餾水移至天平上的小燒杯,進(jìn)行稱重,容積應(yīng)與所選檢測容量點(diǎn)相符,如果相差偏大則需要校準(zhǔn);
4、校準(zhǔn):拔掉推出器,用校準(zhǔn)工具對準(zhǔn)移液器圓形口;
一只手向下按住的同時(shí)旋轉(zhuǎn)量程鎖,如果測量數(shù)偏大則順時(shí)針旋轉(zhuǎn),側(cè)量數(shù)偏小則逆時(shí)針,然后重復(fù)之前的操作,直至測量數(shù)與容積基本一致即可。